简单介绍:小鼠视神经夹伤(Optic Nerve Crush,ONC)模型是一种常用于研究视神经损伤和再生的实验模型。详情介绍:
ONC 小鼠模型的构建
1、实验材料
小鼠视神经夹伤模型,实验对象为8周-12周的野生型C57BL/6J小鼠,体重大约25g左右,雌性及雄性小鼠各半。所有小鼠均以右眼为实验眼。
视神经夹伤手术具体步骤如下,术中注意观察小鼠呼吸及麻醉情况:
(2)确认小鼠处于深度麻醉状态后,给予小鼠右眼1%普鲁卡因滴眼液以降低眼表敏感度,持续时间为2分钟,吸水海绵轻轻移除滴眼液后给予三联kang生素眼膏以保护角膜。对侧眼即左眼给予Genteal眼凝胶以保护角膜;
(3)将小鼠置于显微镜下的加热垫(37℃)上以维持小鼠体温,调整小鼠位置使其鼻侧向右,修剪小鼠右侧睑睫毛,在外眼角处做一水平切口,剪开外眦;
(4)重新调整小鼠位置使其鼻侧向左,沿角膜缘在颞侧结膜上做一个垂直切口,剪开颞侧球结膜,移除结膜切口下多余组织,钝性分离筋膜及肌肉,暴露视神经;
(5)暴露视神经后,用反向镊在球后(略超过视神经底部的色素环,注意避开视网膜血管)1mm处夹持视神经10秒,10秒后移去镊子并轻轻将眼球推回原位,将小鼠球结膜及眼睑复位;
(6)小鼠右眼眼表滴一滴人工泪液,在显微镜下观察小鼠眼底血管情况排除视网膜中央动脉损伤的可能;
(7)在ONC模型构建结束后,立即予小鼠皮下注射ding丙诺啡0.1mg/kg小鼠体重)止痛zhi疗。在小鼠右眼眼表滴一滴1%普鲁卡因滴眼液,持续时间约30秒,移除1%普鲁卡因滴眼液后,在小鼠双眼眼表给予三联kang生素眼膏以保持角膜湿润及预防术后感染;
(8)将小鼠放置在加热垫(37℃)上的鼠笼里(鼠笼中垫纸,鼠笼的一半放置于加热垫上),每15分钟查看小鼠情况并记录直至小鼠完全苏醒,小鼠苏醒后及时在鼠笼中放置水及泡软的食物;
(9)注意在术后三天内每天观察及记录小鼠感染,出血等情况的发生。
2、应用领域
(1)再生医学研究:研究视神经损伤后的再生机制,探索促进神经再生的方法和药物。
(2)疾病机制研究:了解视神经损伤相关疾病的发生fa展过程,如青光眼、外伤性视神经病变等。
(3) 药物筛选:评估潜在zhi疗药物对视神经损伤的zhi疗效果。