应用简介
哮喘是一种严重威胁人类健康的常见呼吸道疾病,是一种非特异的气道慢性变态反应性炎症,以嗜酸性粒细胞 (Eosinophils, EOS)聚集、活化及其高毒性阳离子蛋白的释放、肥大细胞反应为主,并伴随多种炎症细胞、炎症介质及细胞因子的参与的一种慢性炎症性疾病。
支气管哮喘是气道慢性炎性反应性疾病,临床表现为反复发作的喘息、气急、胸闷或咳嗽,这些症状经常在患者接触烟雾、香水、油漆、灰尘、宠物、花粉等刺激性气体或变应原之后发作,夜间和(或)清晨症状也容易发生或加剧。
因哮喘疾病发生、发展过程非常复杂,要经临床实践积累相关经验,并且人体临床实验受到种种限制。因此,在人体深入探讨该病的发病机制、预防及治疗有一定困难。所以,制备哮喘动物模型是进行有关哮喘发病机制或药物治疗研究成功的关键所在。
支气管哮喘模型
过敏原卵清蛋白注入大鼠体内,其可溶性抗原成分刺激机体嗜酸性粒细胞产生特异性免疫素(IgE抗体),附着于肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面,使大鼠处于致敏状态。当大鼠再次接触到此抗原时,每一个抗原分子和致敏肥大细胞、嗜碱性粒细胞的IgE发生抗原抗体反应,使细胞脱颗粒,释放活性物质,作用于支气管引起气道高反应性。
实验方法
①造模组SD大鼠腹腔注射抗原液1 mL(含卵清蛋白100 mg,灭活百日咳杆菌疫苗5×109个和氢氧化铝干粉100 mg)致敏。
②2周后用超声雾化器向密闭箱喷雾1%卵清蛋白,使动物吸入20 min激发。
哮喘模型表现
大鼠模型出现呼吸急促,严重者呼吸减慢或节律不齐,轻度发绀、四肢瘫软、行动迟滞、反应迟钝。连续激发后大鼠体重减轻、毛色失去光泽、反应迟钝。本模型适用于特异性抗原抗体反应的研究,有速发和迟发双相反应。
技术总结
建立大鼠支气管哮喘模型应注意以下几点:
▲卵清蛋白结合灭活百日咳杆菌共同致敏较单独使用卵清蛋白致敏效果突出。
▲多点皮下注射联合腹腔注射的造模成功率高于单纯腹腔注射。
▲适当提高雾化激发液的浓度可以加重模型大鼠的肺病理损伤程度。