小鼠成纤维细胞从小鼠皮肤组织的粘附细胞中分离。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎间充质细胞分化而来。活跃的细胞被称为成纤维细胞。成纤维细胞体积大,界限分明,多为梭形或星形扁平结构,细胞核规则椭圆形,核仁大而明显。纤维细胞是结缔组织中数量最多的细胞,相对静止的细胞称为纤维细胞。
成纤维细胞数量最多,胞体大,多突起的梭形或星形扁平细胞,细胞核规则椭圆形,细胞轮廓不清,有突起。它的形态可以根据细胞的功能变化和其附着的物理性质而变化。纤维小,多角形,细胞质少,嗜酸性弱,细胞核较小,染色较深,电镜下粗面内质网较少,高尔基复合体不发达。
羊栖菜多酚的分离纯化及其对小鼠成纤维细胞抗紫外线损伤作用的研究
采用Folin-Ciocalteu比色法测定羊栖菜多酚含量,并对该方法进行了优化。然后,采用酶辅助提取法提取羊栖菜多酚,并对提取条件进行优化。采用大孔吸附树脂分离纯化羊栖菜多酚,并对纯化条件进行优化,以获得高纯度的羊栖菜多酚。此外,还测定了体外抗氧化能力。
通过羊栖菜多酚对紫外线照射小鼠成纤维细胞的保护和修复作用以及细胞内相关抗氧化酶的变化,研究羊栖菜多酚对小鼠成纤维细胞抗紫外线损伤的影响,为羊栖菜多酚在抗紫外线损伤中的应用提供一定的理论依据和数据支持。
为了阐明羊栖菜多酚对紫外线照射小鼠成纤维细胞抗紫外线损伤的作用,研究了紫外线照射剂量、羊栖菜多酚浓度和时间对细胞生长的影响。结果表明,紫外线辐射剂量越高,对小鼠成纤维细胞的抑制越严重,0.15J/cm2的紫外线辐射剂量最接近半致死剂量,作为后续实验的紫外线辐射剂量。羊栖菜多酚对小鼠成纤维细胞的保护作用随着多酚浓度的增加先增强后减弱,当羊栖菜多酚浓度为90μ g/m L时保护作用最强
从时间上看,加入羊栖菜多酚后,培养4h再用紫外线照射,保护效果最明显。随着时间的延长,保护效果开始下降。羊栖菜多酚对紫外线照射的小鼠成纤维细胞的修复作用也随着羊栖菜多酚浓度的增加先增强后减弱,在80μg/m·l浓度时修复作用最强。此外,羊栖菜多酚还能增强紫外线照射的小鼠成纤维细胞中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性,降低丙二醛的含量。
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