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AB-PAS染色实验方法

作者:admin 浏览量:756 来源:本站 时间:2023-05-31 11:03:56

信息摘要:

PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上主要用来检测组织中的糖类,也称为糖原染色。原理为过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,Schiff试剂可以和醛基反应使检体呈现紫红色。实验步骤1、脱蜡至水二甲苯Ⅰ15min,二甲苯Ⅱ15min,无水乙醇5min,90%乙醇3min,80%乙醇3min,70%乙醇3min。蒸馏水3min,重复3

PAS染色法(Periodic Acid-Schiff stain)在组织学上主要用来检测组织中的糖类,也称为糖原染色。原理为过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,Schiff试剂可以和醛基反应使检体呈现紫红色。

实验步骤

1、脱蜡至水

二甲苯Ⅰ15min,二甲苯Ⅱ15min,无水乙醇5min,90%乙醇3min,80%乙醇3min,70%乙醇3min。蒸馏水3min,重复3次,PBS缓冲液3min,重复3次。

2、阿利新蓝染色液染色

使用阿利新蓝染色液对组织进行滴染或者浸染10-20min。用蒸馏水洗3min,重复3次。

3、氧化剂氧化

使用氧化剂对组织进行氧化5min。用自来水简单冲洗后,用蒸馏水重复洗2次,每次3min。

4、Schiff Reagent侵染

将组织放入Schiff Reagent染液中浸染10-20min(也可采用滴染),浸染结束后用流水冲洗10min。

5、复染细胞核

苏木素复染2min,细胞核变蓝色即可终止,自来水冲洗3min。

6、分化

酸性分化液分化2-5s,自来水冲洗3min。

7、返蓝

用Scott蓝化液进行返蓝1-2min,返蓝结束后用流水冲洗3min。

8、脱水

70%乙醇1min,80%乙醇1min,95%乙醇2min,100%乙醇4min。

9、封片

晾干片子,滴加适量中性树胶封片,盖上盖玻片。

文章出自:动物实验外包   想了解更多请关注:http://www.do-gene.com/