一、实验介绍
旷场实验是经典的情绪相关行为学检测实验, 最早由 Hall 设计。是用于检测动物在陌生环境中的行为表现,包括自发活动行为和探索行为,是评价动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法。检测指标为动物首次进入中央区的潜伏期、中央区停留时间和穿行次数;结合抑郁模型可检测动物的“抑郁样”行为和药物的抗抑郁作用,检测指标为动 物的开场活动性,可人工计数动物的水平爬格次数和垂直站立次数作为行为指标,也可采用 自动摄像记录动物运动轨迹,并采用行为学分析软件进行分析运动距离、运动速度、休息时间等行为指标。该实验亦可用于评价抗抑郁药物的起效速率。
二、实验设备
旷场实验箱通常分为大鼠和小鼠两种规格,其中大鼠旷场实验箱建议尺寸为100cm*100cm*40cm,小鼠旷场实验箱尺寸建议为 50cm*50cm*40cm。实验箱材质采用黑色或者白色单面磨砂亚克力为宜,也可以使用中性颜色(如蓝色)的医用 ABS 工程塑料,内壁不可反光。
三、实验方法
旷场实验操作简单,在用于抑郁行为学评价中,无适期阶段,操作步骤如下 :
(1) 实验前,动物应适应检测环境 30 ~ 60 min;
(2) 动物放入测试箱后,即开始检测,检测时间宜为 5~10 min;
(3) 每次实验时应从同一位置同一方向将动物放入测试箱中央。
四、评价指标
(1) 总路程(total distance):动物在实验记录时间内产生的物理位移累积;
(2) 速度(speed):动物在单位时间产生的物理位移。5min 内正常动物总路程多为1000~2500cm,速度为 3~8cm/ s。动物出现抑郁行为时,速度减少;
(3) 运动总时间(total move time):动物在实验记录时间内的产生物理位 移时所需的时间累积。正常动物运动时间多大于检测时间的 30%;抑郁行为判断标准:与对照组相比有显著性减低(P<0. 05);
(4) 站立次数(number of standing):动物在实验记录时间内的站立总次数。10min 检测时间,正常大鼠站立次数 20 ~ 50 次。10min 检测时间,空白对照组小鼠站立次数 60~130次;抑郁行为判断标准:与对照组相比显著减低 (P < 0. 05)。
(5)粪便数量反应大鼠的焦虑情况。
五、注意事项
1、实验前需要对实验动物每天抚摸 1-2min 以减少非特异性应激刺激对实验动物检测中
的影响。
2、实验过程中需要弱光照明,观察者尽量与测试动物分隔。
3、实验过程中需要环境安静。
4、进行旷场检测时,需要对实验动物进行筛选,有些实验动物在正常情况下水平方向
或垂直方向的活动情况显著低于同批动物平均水平,则需要将这些动物预先剔除。
5、实验前需要提前至少 3 小时将动物带入实验室,降低动物对新环境的不安情绪。
6、实验动物的性别、周龄尽量保持一致,因为激素水平可能会影响动物行为。
7、注意实验动物的昼夜节律,在 24h 内有其活动周期,尽量选择同一时间段开展实验。
8、OFT 实验对动物各方面影响较小,而其他行为学实验(如强迫游泳、水迷宫、悬尾
实验)影响较大,因此同一批动物进行不同行为学测试时,应先进行 OFT 实验。
9、实验应在隔音,光强度和温、湿度适宜且保持一致的行为实验室内进行。
10、两次实验之间清洗实验设备,以免上次动物余留信息影响下次实验结果。
文章出自:动物实验外包 想了解更多请关注:http://www.dj-cro.com/