应用简介
肿瘤细胞通过膜表面特定受体与基质或基底膜的层粘连蛋白、纤维连接蛋白和IV型胶原等相粘连,然后肿瘤细胞可释放蛋白水解酶或激活基质中已存在的酶原,使基质成分降解,最后肿瘤细胞运动而充填到被水解了的基质的空隙处,如此三个过程不断重复肿瘤细胞不断向深层侵袭。
技术原理
本实验采用的Matrigel是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分,含有LN、IV型胶原等。将Matrigel铺在Transwell侵袭小室的多孔滤膜上,能形成与天然基底膜极为相似的基底膜结构。具有侵袭能力的细胞在趋化剂诱导下可穿过多孔滤膜,侵袭细胞经染色后,在显微镜下观察和计数。
实验方法
注意事项
1、照相前一定要晾干,照相时将小室正置于载玻片上,在倒置显微镜下观察、照相。
2、使用Matrivgel前应从-20℃转移至4℃待其自然溶化(如过夜放置),避免反复冻融。
3、使用时需接触Matrivgel的试管、移液吸头等均应预冷于4℃。
4、使用Matrivgel时注意无菌操作。