细胞划痕实验，因为其成本低并且操作简单的优势，是目前绝大多数细胞实验公司用来检测细胞迁移能力的一种方法。
细胞划痕实验看似简单，以为画个线就可以了，但实际上，不少实验人员在这上面也栽了很多跟头，细胞铺板数量过多/过少、划痕不均一、细胞不迁移等等情况时有发生！那怎么操作才能获得我们想要的结果，怎么样做才是正确的呢？一起来看看吧~
1、培养板划线标记
细胞划痕实验开始前，需要使用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀的划平行线（线要直），各水平线间的间距为0.5-1cm，每孔至少画5条水平线，方便之后镜下观察每个区域，我们提醒：划线时注意线不要太粗。
2、细胞铺板
紧接着进行细胞划痕实验的第二步，胰酶消化细胞，制备细胞悬液。细胞计数后铺板，保证每组细胞铺板密度一致，一般在孔内接种约5-10×105个细胞（可根据细胞的生长快慢调整接种数量）。我们提醒：一定要等到细胞铺满，彼此之间没有空隙，不然会影响后续数据分析。
3、制造划痕
待细胞铺满后，用直尺比着，使用20ul枪头垂直于孔板和线制造细胞划痕，使划痕与标记线相交。我们提醒：进行细胞划痕实验的划痕步骤时，划痕的枪头一定要垂直，千万不要倾斜，力气也不要是大事小，这样容易影响后面的实验结果。
4、洗去划下的细胞，换液处理
细胞划痕实验的划痕完成后，用显微镜照相，作为0h对照。吸去旧培养基，再使用无菌PBS洗细胞3次，洗去划下的细胞，使留下的间隙肉眼即清晰可见。然后加入新鲜无血清或低血清（<2%）的培养基。根据需要设加实验组、对照组。不需加药的空白对照组只需添加等量的无血清培养基即可，药物干预组加入含药物的无血清培养基。东极生物提醒：在用PBS缓冲液冲洗时，注意贴壁慢慢加入，以免冲散单层贴壁细胞。
5、细胞培养与定时拍照观察，并进行数据分析
最后，将细胞放入37℃，5%CO2培养箱中培养。然后在适当的时间点（根据个人实验需要）取出细胞，在显微镜下观察划痕宽度并拍照。提醒：细胞划痕实验中，一般按0，6，12，24小时拍照，建议不要把观察时间设置的太长，因为很容易造成细胞污染死亡或者过度增殖造成的假阳性结果。
细胞实验外包 想了解更多请关注：https://www.do-gene.com/
