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细胞划痕实验中,做好这些细节,你的实验结果更完美!

作者:admin 浏览量:5 来源:本站 时间:2026-06-12 08:50:52

信息摘要:

细胞划痕实验的实验原理很简单,其实就是在融合的单层细胞上,我们人为的制造一个空白区域,这个空白区域我们就称为“划痕/伤口”,而后随着时间推移,划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕/伤口”愈合,然后我们就可以在细胞迁移过程中,定期拍照捕获图像,再通过测量不同时间点的划痕间距并计算差值,就可对细胞的迁


细胞划痕实验的实验原理很简单,其实就是在融合的单层细胞上,我们人为的制造一个空白区域,这个空白区域我们就称为“划痕/伤口”,而后随着时间推移,划痕边缘的细胞会逐渐进入空白区域使“划痕/伤口”愈合,然后我们就可以在细胞迁移过程中,定期拍照捕获图像,再通过测量不同时间点的划痕间距并计算差值,就可对细胞的迁移能力做出个判断来了。


而这个细胞划痕实验,我们也协助做过不少,可谓得心应手,对于这个实验,有几个重点细节可以分享给大家~(做好这些细节,你的细胞划痕实验实验结果会更完美!)


细胞划痕实验细节1:铺细胞最好使用 6 孔板;


因为 6 孔板可以保证有相当距离的平直划痕,而且因为有 5 条定位线,与划痕相交,这样就有10 个可固定监测点,不作重复,误差也很小。


细胞划痕实验细节2:使用无血清培养基降低增殖对实验结果的影响;


如果是连续监测 24 小时,那你需要考虑到划痕缩小的情况,是不是细胞迁移和细胞繁殖共同作用的结果,这时候,可以使用无血清培养基降低增殖对实验结果的影响;只是, 也提醒下:虽然无血清培养可以忽略细胞增殖的影响,可由于细胞内信号传导系统整体性的下调节,细胞迁移的速度也会慢很多的哦。


当然,划痕面积变得更大了也不好,因为一般正常来说,划痕会有愈合的趋势,细胞向空白处迁移,划痕面积更大很有可能是细胞转态不好,开始凋亡了,或者说铺板太满了,划痕一划,细胞连在一起整块被划落所导致的,这种情况下,没别的办法,建议直接重新做一遍。


细胞划痕实验细节3:尽量清洗掉散落的细胞;


需要尽量清洗掉散落的细胞,只是需要注意的是,我们在用 PBS 缓冲液冲洗的时候,不要随意冲洗,而是要有技巧的沿着贴壁慢慢加入冲洗,过猛会冲散单层贴壁细胞,影响我们最终的实验结果。


最后,有需要重点提醒下:细胞划痕实验,这并不适用于所以的细胞,那些呈团簇状生长的细胞、悬浮细胞就不能进行划痕实验。


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