我们学会了如何进行细胞培养后,接下来就是正儿八经的开始进行细胞实验了,但是这常见的几种细胞实验,你都会了吗?
1、细胞增殖实验
CCK-8实验:常用的CCK-8法其实就是MTT的升级版,因为CCK-8细胞活性检测试剂中含有WST-8,一种类似于MTT的化合物,可为线粒体内的脱氢酶验明正身。细胞增殖越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。
BrdU掺入法:通过测定细胞的DNA合成含量来评价细胞的增殖能力,是目前实验室中检测细胞增殖最准确方法,如Brdu掺入法,常应用于细胞DNA修复,分化及细胞标记物追踪等方面。
平板克隆实验:将细胞消化成单细胞悬液,按合适的密度铺到培养皿中,贴壁细胞会在培养皿中贴壁,不是每个贴壁细胞都能增殖和形成克隆,但能形成克隆的细胞一定是有增殖活力的,所以可以根据细胞的克隆形成率来判断细胞的增殖能力。
2、细胞凋亡实验
PI染色、Hoechst染色:在细胞周期的各个时期,DNA 的量都有所区别,可通过检测DNA含量确定细胞所处的时期。PI是一种核酸染料,既能染DNA,也能染RNA,能发出红色荧光。在细胞凋亡时,细胞核会发生变形、浓缩、碎裂,因此我们可以通过检测细胞核的形态来判断细胞是否凋亡,比如用Hoechst 染色。
TUNEL染色、Annexin V-PI染色:DNA 断裂时,DNA 的 3’端断裂口会出现游离的 3’-OH,可以使用 TUNNEL 法进行检测。细胞膜还会发生的一个变化是破损外翻,这样我们就可以用一些标记细胞膜内侧的染料来检测细胞膜是否外翻,配合检测细胞核内物质的染料进行双染,判断细胞凋亡的进程,比如 Annexin-V/PI 双染。
3、细胞迁移/黏附/侵袭
细胞划痕实验、transwell实验:细胞划痕实验以及Transwell实验(不铺胶/铺胶)是分析细胞迁移/侵袭能力最常用的两个方法。
细胞粘附实验:细胞粘附实验通常分为两类,即细胞与细胞粘附和细胞与基质粘附。
细胞实验外包 想了解更多请关注:https://www.do-gene.com/



