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细胞实验外包——细胞换液都做不好,你还做什么实验?

作者:admin 浏览量:2 来源:本站 时间:2026-04-03 08:36:09

信息摘要:

做实验的人都懂,如果前期细胞没养好,后期做实验,即使你实验技巧再高,也是巧妇难为无米之炊,所以细胞培养在实验中是很重要的一环!但是对于很多科研新手来说,别说细胞培养实验了,就连简单的细胞换液这一项最常规的操作也是问题频出,经常性的造成细胞污染,那如何进行有效并正确的细胞换液呢?细胞培养实验之细胞换液


做实验的人都懂,如果前期细胞没养好,后期做实验,即使你实验技巧再高,也是巧妇难为无米之炊,所以细胞培养在实验中是很重要的一环!


但是对于很多科研新手来说,别说细胞培养实验了,就连简单的细胞换液这一项最常规的操作也是问题频出,经常性的造成细胞污染,那如何进行有效并正确的细胞换液呢?


细胞培养实验之细胞换液第一步:准备耗材和试剂


准备好所需的实验耗材,所有耗材均需要经过高温灭菌处理。还有就是新手一定要记得所有进入细胞房里的物品都要经过紫外传递窗,这样灭菌后可以更大程度减少污染,当然,每天第一次使用细胞间前,也要记得开启房间紫外照射半小时。房间大紫外照射完成之后,开启层流净化系统,通风20分钟以上,方可进人,避免房间残留的臭氧影响健康。此处强调,存在部分对温度尤为敏感的细胞,此类细胞培养前,需要将培养基与血清在恒温箱中预热后使用。


尤其注意,所有的无菌液体在转移或是保存时,应当稳定,避免内部液体晃至瓶口。相对于无菌液体容器的内壁,其瓶口是污染的危险区域,晃至瓶口的液体再逆流回容器内,可能大大提高污染的概率。


细胞培养实验之细胞换液第二步:准备实验台面


台面的正前方摆放移液枪,左前方摆放枪头和培养基等液体,灭菌离心管摆在右前方,在这再次提醒:一定要这时候再次确认所需的耗材、试剂是否齐全,别等到换液过程中才发现遗漏。


细胞培养实验之细胞换液第三步:观察细胞


及时发现轻度污染的细胞或是状态不佳的细胞,可以避免后续更加严重的时间、经历和经费的损失。注意,取细胞的时候,一定不要触碰培养瓶底壁,因为触摸培养体系留下的污渍,有时候会对测量结果产生巨大的影响。就像前面说的,无菌液体要避免晃至瓶口,对于细胞培养瓶亦是如此,在端起培养瓶时,瓶口应当微向上,从而防止培养基晃至瓶口。


确认细胞状态良好之后,就可以进入细胞培养实验中的细胞换液的阶段了。


细胞培养实验之细胞换液第四步:正式细胞换液


换液的基本流程包括:抽弃旧培养基;D-Hanks清洗细胞,即加入1800μl的D-hanks,静置30s;抽弃D-Hanks;补入2700μl培养基;补入300μl血清。


细胞培养实验细胞换液其具体的相关操作细节如下:提前拧松所需液体的瓶盖,以备之后的单手开盖操作。移液枪提前调好量程再插枪头,一旦插上枪头就开始干净利落的移液动作。注意将无菌液体的瓶盖拧下后,盖子冒口应当向下放置。


吸取液体时,注意只要把枪头部分伸进瓶口,移液枪柄一定要注意不要伸入瓶口,不然容易造成污染,当然,无菌液体用完后速度把瓶口也要关闭。尤其注意,使用移液枪抽弃废液时,枪尖距离废液缸口应保持一定距离,避免回溅的液体污染枪尖,进而被带入无菌液体或者细胞培养体系。



文章出自 细胞实验外包   想了解更多请关注:http://www.dj-cro.com/