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细胞实验外包——细胞培养实验中的单层贴壁细胞的传代怎么操作?

作者:admin 浏览量:3 来源:本站 时间:2026-04-06 08:38:56

信息摘要:

细胞传代培养不仅可以增加细胞数量,也可保持细胞的稳定性等等,但对于新手来说,胞培养实验中的细胞传代具体应该怎么操作,其实并不是很清楚,今天就系统说下!建议新手收藏一下,以备不时之需!细胞培养实验细胞传代操作第一步:吸弃旧培养液,等渗液清洗。清洗的目的一来是尽可能洗干净细胞的代谢废物,另一方面,也是为


细胞传代培养不仅可以增加细胞数量,也可保持细胞的稳定性等等,但对于新手来说,胞培养实验中的细胞传代具体应该怎么操作,其实并不是很清楚,今天就系统说下!建议新手收藏一下,以备不时之需!


细胞培养实验细胞传代操作第一步:吸弃旧培养液,等渗液清洗。清洗的目的一来是尽可能洗干净细胞的代谢废物,另一方面,也是为了洗去先前培养基中的血清。若无清洗步骤,则残留的血清足以干扰后续胰酶的消化效果。


细胞培养实验细胞传代操作第二步:足量含EDTA的胰酶(300~400μl)覆盖贴壁细胞,前后倾倒培养瓶,铺匀胰酶。细胞的消化程度需在镜下观察,镜下见细胞间出现间隙即可中止消化。若见细胞变圆,甚至随着胰酶的流动而脱落,则消化严重过度,可能对细胞造成不可避免的损失。


细胞培养实验细胞传代操作第三步:竖立培养瓶,待挂壁的胰酶流至培养瓶角落。移液枪及时吸出胰酶,补入培养基1800μl(900μl量程,两枪)。


细胞培养实验细胞传代操作第四步:使用移液枪(900μl量程)反复吹打培养皿底部细胞,使细胞脱离。


细胞培养实验细胞传代操作第五步:细胞悬液移入离心管,加5~10%血清,800~1200rpm离心5min。


细胞培养实验细胞传代操作第六步:离心完成后,移除离心管中上清液,注意保护离心管中的细胞团块。


细胞培养实验细胞传代操作第七步:加入新的培养基,轻柔吹打细胞团块,重新悬浮并混匀细胞团块。


细胞培养实验细胞传代操作第八步:细胞计数或活细胞计数,根据细胞密度,计算稀释到合适细胞密度(5万/ml),接种至培养瓶。


细胞培养实验细胞传代操作第九步:镜下观察,培养瓶转入孵箱。


文章出自 细胞实验外包   想了解更多请关注:http://www.dj-cro.com/