PAS 染色又称过碘酸雪夫染色,是一种常用的组织化学染色方法,以下是关于它的详细介绍:
基本原理:过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与 Schiff 氏液的无色品红结合,形成紫红色复合物,定位于胞浆上。
染色步骤
脱蜡与水化:将组织切片放入二甲苯中脱蜡,然后依次经过梯度酒精进行水化,使切片处于水溶性环境,以便后续试剂能与组织成分充分接触。
高碘酸氧化:将切片放入高碘酸溶液中进行氧化反应,一般持续 5-10 分钟,使多糖类物质中的羟基氧化成醛基。
Schiff 试剂染色:把氧化后的切片放入 Schiff 试剂中,醛基与 Schiff 试剂中的亚甲基蓝发生反应,通常染色 15-30 分钟,形成紫红色产物。
分化与漂洗:用硫酸亚锡溶液对切片进行分化,去除多余的染色物质,然后用自来水漂洗,使切片背景清晰,便于观察。
苏木精复染:用苏木精对切片进行复染,使细胞核呈现蓝色,与被染成紫红色的多糖物质形成对比,利于对细胞结构和病变的观察。
脱水、透明与封片:将切片依次经过梯度酒精脱水、二甲苯透明,最后用中性树胶封片,以便长期保存和在显微镜下观察。