以下是关于阿利新蓝染色的详细介绍：
基本原理
阿利新蓝是一种阳离子染料，分子结构中的异硫脲基具有中度碱性，使得染料带阳离子。组织内的酸性粘液物质含有阴离子基团，如羧基和硫酸根，阿利新蓝可与这些阴离子基团形成不溶性复合物，从而使酸性粘液物质染成蓝色。通过调整染液的 pH 值，可以区分不同类型的酸性粘液物质，如在 pH2.5 时，组织内的羧基电离，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有羧基的组织（如蛋白多糖、透明质酸以及上皮酸性黏蛋白）染色；在 pH1.0 时，组织内的硫酸根电离，与阿利新蓝中的阳离子形成盐键，使带有硫酸根的组织（如硫酸黏液物质）染色。
操作步骤
以石蜡切片为例，阿利新蓝染色的一般步骤如下：
样品固定：将组织样品固定在 10% 中性缓冲甲醛中，通常固定时间为 12-24 小时，固定后用蒸馏水清洗样品以去除固定剂。
组织切片：将固定好的组织依次经梯度乙醇脱水（70%、80%、90%、95%、100% 乙醇，分别 5 分钟），然后进行二甲苯透明处理，接着将组织包埋在石蜡中，用切片机将石蜡包埋的组织切成 4-6 微米厚的切片，并将切片铺展在载玻片上。
脱蜡和再水化：石蜡切片用二甲苯处理两次，每次 5 分钟，以去除石蜡，再将切片依次放入 100%、95%、80%、70% 的乙醇中，每步 3 分钟，使其再水化，最后用蒸馏水冲洗。
阿利新蓝染色：将载玻片或细胞样品放入预先制备的 1% 阿利新蓝染色液中，染色时间通常为 30 分钟至 1 小时，染色后用蒸馏水轻轻漂洗样品 3 次，每次 2 分钟，以去除未结合的染料。
酸性清洗（可选）：为了去除非特异性染色，可以使用 0.1N 盐酸溶液进行快速清洗，通常数秒，随后立即用蒸馏水冲洗。
脱水：将染色后的切片依次放入 70%、80%、95%、100% 的乙醇中，每步 2 分钟，进行脱水，随后用二甲苯处理两次，每次 2 分钟，以透明样品。
封片：用适量封片剂封闭切片，盖上盖玻片，避免气泡产生。
